Betreuer:
Dr. Jan Stange
Dipl.Biol. Melanie Stiffel
(e-mail: melanie.stiffel2@uni-rostock.de )
Biologische Wirkung von Caprylat und N-Acetyltryptophan - Auswirkungen in
humanen Albuminlösungen für therapeutische Anwendungen
Anhand der Hepatozyten
Zelllinie HepG2 / C3A wurde die biologische Wirkung der im herkömmlich
erhältlichem Standard Albumin vorkommenden Stabilisatoren Caprylat und
N-Acetyltryptophan untersucht. Die Zellen wurden jeweils mit
stabilisatorbehafteten und stabilisatorfreiem Albumin inkubiert. Durch
verschiedene Zellkulturtests zur Toxizitätsprüfung wurde bewiesen, dass beide
Stoffe einen negativen Effekt auf die Leberzellen hatten. Es kam zur
Unterdrückung der Zellproliferation, die Zellen könnten sich nicht vermehren.
Hinsichtlich der Vitalität konnte belegt werden, dass Caprylat sogar toxisch
auf die Leberzellen wirkte. Ebenfalls war die Toxizität von Caprylat verbunden
mit einer erhöhten mitochondrialen Aktivität und P 450 Aktivität des Subenzyms
CYP1A2, so dass hier letztere im Zusammenhang mit toxischen Effekten gewertet
wurden. Die Aktivierung des Subenzyms durch N-Acetyltryptophan war nicht mit
einer höheren Toxizität verbunden. Die HepG2 / C3A Zellen, welche mit dem
gereinigtem Albumin versorgt wurden, zeigten gleich gute Reaktion wie die
Kontrollen. Die Zellproliferation und –vitalität waren sehr gut und die
Stoffwechselreaktion genauso normal wie bei den Mediumkontrollen. Außerdem
konnte anhand von Patientenplasmen ebenfalls dokumentiert werden, dass die
Behandlung mit stabilisatorfreiem Albumin einem positiveren Effekt auf die
Patienten hatte als herkömmliches stabilisatorbelastetes Albumin.
The biological effect of
the albumin stabilizers caprylate and N-acetyltryptophane was studied on a
hepatocyte cell line HepG2 / C3A. The cells were incubated with commercial
albumin containing caprylate and N-acetyltryptophane and with stabilizer
depleted abumin. The negative effect of both stabilizers to the liver cells
were demonstrated with different cell culture tests for toxicity. The cell
proliferation was eliminated. The results of the cell vitality showed a toxic
effect of caprylate. Also a high mitochondrial activity and P 450 activity of
the subenzyme CYP 1A2 were detected in association with caprylate, which shows
the toxic effect of this stabilizer as well. The activation of the P 450
subenzyme by N-acetyltryptophane had not a high toxicity. The HepG2 / C3A
cells, which were incubated with stabilizer free albumin had the same good
results like the media controlls. The cell proliferation and –vitality were
very good and the metabolism results were normal as the results from the media
controlls. Furthermore the positive effect of stabilizer depleted albumin could
demonstrated with patient plasma before and after a treatment with stabilizer
containing and stabilizer free albumin.